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弱極性色譜柱的反沖技術(shù)簡析

   弱極性色譜柱是實驗室常用的一種色譜耗材,通常情況下選擇色譜柱都會從它的固定相,色譜柱的長度、規(guī)格、口徑還有膜厚度來進(jìn)行選擇。色譜柱上基本都有->標(biāo)志,表示流動相的流動方向,有的在色譜柱上印有“Nerver Lot Flow in the OppositeDirection”字樣,翻譯成“絕不能反沖”的意思,但在工作中,用色譜柱反沖技術(shù)修復(fù)色譜柱可起到柱效提高、柱效恢復(fù)的效果。
  色譜柱使用一段時間后柱效下降,此時可拆下柱入口端螺帽,去掉1-2mm被污染填料,再用相同填料填滿,然后用流動相反沖一下,可使柱效恢復(fù),因反沖可以改善柱頭死空間。
  因反沖可把沉積在過渡板上的細(xì)微顆粒沖走,有時也可用反沖技術(shù)使柱壓降低。
  一些色譜柱的反沖介紹:
  如果是已經(jīng)保存好的色譜柱:
  1.反向接柱,先用95水:5乙腈0.2 ml/min,沖20倍柱體積;然后用(CH2)4O,0.2 ml/min,沖20倍柱體積;后用95乙腈:5水,0.2 ml/min,沖20倍柱體積;
  2.正向接柱,用65乙腈水保存色譜柱。
  如果是剛走完樣的色譜柱:
  1.卸掉保護柱;
  2.正向接柱,常規(guī)方法沖洗色譜柱(先95水,后95乙腈或甲醇);
  3.反向接柱,先用95水:5乙腈0.2 ml/min,沖20倍柱體積;然后用(CH2)4O,0.2 ml/min,沖20倍柱體積;后用95乙腈:5水,0.2ml/min,沖20倍柱體積;4.正向接柱,用65乙腈水保存色譜柱。